注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

規格：100T/48S

產品內容：

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加入0.6ml試劑一充分溶解。可分裝后-20℃保存，避免反復凍融；

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。臨用前加入6mL試劑一充分溶解；可分裝后-20℃保存，避免反復凍融；

試劑四：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。臨用前每瓶加入6mL 試劑一混勻，可分裝后-20℃保存，避免反復凍融；

試劑五：液體3mL×1瓶，4℃保存。

標準品：粉劑×1支，4℃保存。臨用前加入1.04mL提取液配成100µmol/mL 的標準溶液；

顯色液的配制：臨用前根據用量按照試劑三（V）：試劑四（V）：試劑五（V）=1：1：0.5的比例充分混勻，現配現用；

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產物，與糖代謝、脂類代謝、蛋白質代謝及細胞內能量代謝密切相關，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸，同時使NAD⁺還原生成NADH和H⁺，H⁺傳遞給PMS生成的PMSH₂還原特異性底物，在450nm處有特征吸收峰。

天平、研缽/勻漿器、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、乙醇和蒸餾水。

一、樣本處理：

組織：按照質量（g）：提取液一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，12000g離心10min后取上清待測。

b. 細胞：按照細胞數量（106個）：提取液一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；于4℃， 12000g離心10min后取上清待測。

c. 血清（漿）：取100µL血清（漿）加入0.9mL提取液，4℃ 12000g離心10min后取上清待測。

二、測定操作

1、分光光度計/酶標儀預熱30min，波長調至450nm，分光光度計用蒸餾水調零。

2、標準液的稀釋：將100µmol/mL 的標準溶液用蒸餾水稀釋為10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0µmol/mL的標準溶液待測。

3、加樣表：

	測定管	對照管	標準管	空白管
樣品（µL）	10	10	-	-
標準品（µL）	-	-	10	-
蒸餾水（µL）	-	10	-	10
試劑一（µL）	40	40	40	40
試劑二（µL）	10	-	10	10
工作液（µL）	140	140	140	140
于 37℃準確反應 30min。于 450nm 處測定吸光值，分別記為 A 測定管，A 對照管，A 標準管，A 空白管，計算?A 測定=A 測定管-A 對照管；?A 標準= A 標準管-A 空白管。